内生菌与雷公藤细胞悬浮共培养的生理生化特性

将2株雷公藤内生真菌Fusarium oxysporum NS33与Penicillium steckii NS6、2株内生细菌Enterobacter cloacae sub sp LG3与Serratia marcescens LY1及其组合分别与雷公藤细胞悬浮共培养,对不同培养体系内雷公藤细胞的生长及其生理生化特征进行研究。结果显示,在共培养前期,与对照相比,接种单一内生菌株提高了细胞的干重,其中菌株NS6的促生效果最明显;而在共培养后期,无论是单一内生菌还是混合内生菌均对细胞生长具有抑制作用。内生真菌和菌株组合处理的培养液p H值有明显的升高,而内生细菌LY1则明显降低了培养液的p H值,其具有产酸性。另外,当雷公藤细胞同混合菌株共培养时,培养基中总糖消耗量是最大的,而接种单独菌株时则对细胞可溶性蛋白含量具有一定的提高作用。接种内生菌会影响雷公藤细胞的POD、CAT及SOD活性,与对照相比,接种单独菌株会更加提升POD与CAT的活性,而细胞MDA含量则明显下降。     

雷公藤和昆明山海棠形态变异的研究

对雷公藤种质资源进行调查,建立种质资源收集库,定期观察雷公藤表型性状,研究形态标记的遗传变异,结果表明,雷公藤与昆明山海棠的叶片大小、叶背白粉、花序大小等主要分类特征存在显著的差异,但其变异是连续的,而且地理分布也是连续的;昆明山海棠、雷公藤均能适应长江流域的气候条件,但不同种源生长情况及主要活性成分含量存在明显的差异.雷公藤与昆明山海棠现行分类问题值得商榷,两者应属同一种植物,雷公藤与昆明山海棠的遗传多样性预示着遗传改良具有巨大的潜力.     

雷公藤二萜成分研究

研究雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook．f.)根心部分的化学成分。采用硅胶柱色谱法进行分离，从其氯仿提取物中分得11个二萜化合物，经波谱分析化合物分别鉴定为：triptoquinonoeA(1)，山海棠酸(2)，triptoquine(3)，异雷酚新内酯(4)，山海棠素(5)，雷酚萜甲醚(6)，雷公藤内酯三醇(7)，雷公藤酮(8)，雷公藤甲素(9)，tripterfordin(10)，雷酚新内酯苷(11)。化合物11为新化合物。     

雷公藤对菜青虫的毒理效应及防治试验

本试验研究了雷公藤属(Tripterygium)二种植物(雷公藤(T.wilfordii)及昆明山海棠,(T.hypoglaucum)的抽提物对青菜虫(Pieis rapae)的一些室内毒理效应及田间防治试验。结果表明,二种植物的抽提物对菜青虫具有拒食、毒杀,抑制生长发育等作用;处理后的幼虫大多数在体表出现黑斑,黑斑部分的表皮结构受到破坏;从昆明山海棠中抽提的一种纯生物碱——雷公藤次碱对菜青虫的体重和呼吸作用有严重的影响;同时,处理幼虫的脂肪体少且不饱满,消化道干瘪,中肠肠壁细胞和围食膜受到破坏。雷公藤根皮乙醇抽提物用于田间防治菜青虫效果良好。     

雷公藤属植物生物学特性与生态适应性的初步研究

历时4 a,调查了我国27个县(市)雷公藤属Tripterygium种质资源,建立种质资源收集库,定期观察雷公藤母本及无性系表型性状和生态适应性。结果表明,不同种质雷公藤的萌蘖性、生长势与造林成活率均存在差异,雷公藤T.wilfordii萌蘖性能明显优于昆明山海棠T.hypoglaucum,野生植株、种质资源收集库内母本及无性系后代均表现一致;在浙江丽水低海拔地区栽培,雷公藤造林成活率和幼林生长势也明显优于昆明山海棠。浙江类似地区雷公藤药材栽培应优先选用雷公藤,良种选育重点在雷公藤分布区内进行,既可提高良种选育效率,又可保证选育的良种适合丽水地区环境条件。表4参5     

利用植物与植物性杀虫剂防治小菜蛾的研究

试验以芥菜和雷公藤为材料，对小菜蛾进行生物防治研究．结果表明：大叶芥和皱叶芥诱集小菜蛾产卵效果较好，摘除部分叶子的大叶芥和皱叶芥效桌更好。雷公藤乙醇提取物浓度在1．5％以上，喷洒3d后对小菜蛾的防效在70％以上。芥菜的诱集和雷公藤的毒杀结合，可达到生物防治目的。     

雷公藤总生物碱对小菜蛾的生物活性

研究了雷公藤总生物碱对小菜蛾的杀虫活性和作用方式。结果表明，雷公藤总生物碱对2龄小菜蛾有很强的拒食、毒杀和生长抑制作用。选择性与非选择性拒食中浓度AFC50分别为42．44mg／L和46．6mg／L，72h时毒杀中浓度‰为388．5mg／L，生长抑制中浓度为EC50为123．3mg／L。     

雷公藤扦插育苗试验

用雷公藤枝条作材料进行扦插育苗试验,结果表明,最佳扦插时间为12月前后,成活率超过98%,在2-3月移栽扦插苗,成活率达100%。     

双向固体发酵后雷公藤菌质化学成分研究

目的：在前期药理实验基础上,分析双向性固体发酵后雷公藤菌质的化学成分。方法：采用高效液相色谱法和薄层色谱法,研究雷公藤药材和不同发酵时间药性菌质的化学成分动态变化规律。结果：药性菌质的雷公藤甲素含量低于原药材低;分别在218nm和250nm波长下,高温灭菌药材和发酵30d的药性菌质的液相图谱有3处明显的变化;乙酸乙酯提取物的薄层层析发现有一蓝色斑点为发酵后新增成分,而甲醇提取物薄层层析发现有2个斑点随发酵时间的延长含量降低。结论：雷公藤经药用真菌发酵后化学成分发生变化,其中一些化学成分的变化规律与药理实验结果存在相关性,可作为发酵终点判断标准。     

具杀虫活性雷公藤内生菌的分离与筛选

以卫矛科植物雷公藤的根、茎、叶为材料分离得到内生菌183株,其中真菌111株,放线菌23株,细菌49株。雷公藤植株的不同组织部位的内生菌数量有较大的差异,雷公藤根中分离得到的内生菌最多(89株),占总数的48.63%,叶部次之(72株),占总数的39.35%,茎部分离得到的内生菌最少(22株),占总数的12.02%。以卤虫、蚊幼及蚜虫为试虫,对183株内生菌的杀虫活性进行筛选,得到3株对蚜虫具有较高毒杀活性的菌株。其中菌株11-6-76的胞内和胞外代谢物均具有较高的杀蚜活性,蚜虫的死亡率分别为78.64%和70.75%;菌株11-3-37和12-2-47的胞内代谢产物提取物对蚜虫的毒杀活性较高,蚜虫死亡率分别为82.74%和76.97%。菌株11-3-37、11-6-76和12-2-47胞内代谢产物粗提物对蚜虫的LC_(50)分别为34.8mg/mL、31.2mg/mL和46.4mg/mL。